有ldquo负rdquo众望生化

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随着医疗行业的高速发展，全自医院已逐渐普及，临床检验对设备的依赖和重视程度也逐渐增高。在生化检验工作中，时常会碰到检测结果为负值的情况，它就像是一种疑难杂症，现象多种多样，有时是发生在不同样本同一项目上，有时是同一样本不同项目，有时是多个样本，有时是单个样本，这种负值结果给我们的审核造成很大困扰。

负值是怎样产生的

我们以两点线性项目为例，计算公式为C=K*（R-R0）。

C是样本浓度，K是校准得到的K值。

R是样本反应度，也就是参数界面设置的两点间吸光度的差值，但并不是简单的将两点的吸光度相减。

R0为试剂空白，不管是样本检测、定标还是质控都需要减去试剂空白，但是出于试剂成本、时间成本的考虑，绝大多数生化仪均不做实时试剂空白，而是用定标时的试剂空白代替，在完成样本检测后直接减去计算。因此当长时间不定标或者试剂不稳定时，试剂本底就会出现比较大的波动。

K、R和R0都与吸光度有关，所以凡是会造成吸光度不正常变化的因数都有可能造成负值的结果。

负值结果的影响因素1仪器因素

样本针堵针或空吸，常见于连续多份检验报告中出现负值；光源灯光路不稳定或比色杯受污染，多为随机样本检测结果为负值，一般不会出现连续多份样本结果异常。

对应处理方法：①取下样本针，用力推拉含清洗液的注射器去除针管壁污物，用无水乙醇进行擦拭，再将样本针位置调整在样本杯中心；②更换光源灯以及清洗比色杯后再进行重新测定。

2样本因素

样本量过少；血清中有纤维蛋白原或者血清中有气泡；样本脂浊，会造成某一份样本的检测结果中出现多个项目结果为负值。

对应处理方法：①将血清分离后使用加样器转至专用样本杯中测试；②除去血清中的气泡，将纤维蛋白原用竹签挑出；样本完全凝固之后，重新进行离心测试；③样本用生理盐水进行稀释，将样品空白降低，使检验结果的准确性提高。

3试剂和人为因素

试剂污染、失效、人为放错试剂位置，常见于连续多份检验报告中出现负值。

对应处理方法：对试剂的颜色改变和有效期进行定期检查，如发现异常应及时进行更换；更换不同批号的试剂需进行定标；规范检验操作流程。

4水质因素

水质导电率的超标易导致离子类项目检测结果出现负值。

对应处理方法：定期对水质导电率进行检查，对有问题的应及时更换前处理滤网、水机树脂，以保证水质导电维持在正常范围。

5其他

如底物耗尽，通常是标本浓度太高，试剂里面的反应物不够用，造成吸光度异常下降或上升，一般酶类项目会出现此现象。

对应处理方法：稀释重测或使用迈瑞配套的酶线性拓展功能可大幅度降低此现象的发生。

以上因素产生的负值，如果日常对仪器维护保养得当，多数可以避免，但是我们还会碰到一些特殊的难以避免的负值结果，如以下案例。

负值案例分享

某日科室老师在审核样本结果时，发现有一例样本谷丙转氨酶（ALT）的结果为负值（-41.3），复测以及增量复测也是负值,该结果如何审核？

由于仅仅这一个样本出现负值，而且也复查过，排除了仪器、试剂、水质和人为因素，难道问题出现在该样本上？观察样本并无脂血，无纤维蛋白原，血清量也充足，我们再看看反应曲线如何。

左图为负值样本反应曲线，右图为正常样本反应曲线

反应曲线副波长吸光度上升（正常情况下，副波长除了特殊的干扰外，基本是平直不反应的），由此初步分析此负值可能是因为受到了某种干扰。

对该样本进行5倍、10倍、20倍梯度稀释，随着稀释倍数的增大，反应曲线趋于正常，且稀释后结果不成比例，明确干扰存在。（在没有干扰物的情况下，随着样本逐渐稀释，分析物的测量浓度应呈线性或平行下降。若样本经稀释后，结果不成比例，则说明有干扰的存在）。

那么究竟是何种干扰物质呢？询问临床医生，该患者为门诊患者，并无相关用药史，查看患者其他生化异常结果，其中总蛋白严重偏高。

既往研究中，总蛋白≥g/L的份结果中只有两类样本：一类是由于样本脂血或呈乳糜样使总蛋白假性升高,约占94.75%(份)；另一类是临床明确诊断为多发性骨髓瘤（MM）的患者,约占5.25%(83份)。在诊断为MM的87例患者中有83例(95.4%)的患者总蛋白≥g/L,有4例(4.6%)的总蛋白为g/L[1]。

如此，该患者会不会是MM患者呢？联系临床医生，建议给患者检测免疫球蛋白，得到IgG结果为96.4g/l（正常参考值为7.51-15.60，严重超过参考值上限）。

同时该患者的肾功能也存在问题，胱抑素C和β2-微球蛋白（β2-MG）也是偏高的，尤其是β2-MG严重偏高。研究表明，血清β2-MG联合免疫球蛋白检测在诊断MM方面有着极大的临床价值[2]。

该患者TP、IgG和β2-MG均大幅升高，说明该患者存在多发性骨髓瘤的可能性非常大，甚至病情处于危重期，故提醒临床医生，尽快


本文编辑：佚名
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