魏旭东教授研究荟萃之71多发性骨髓瘤

多发性骨髓瘤患者血清神经元特异性烯醇化酶水平检测及其临床意义

米瑞华杨海平王倩魏旭东尹青松朱兴虎宋永平

本文发表于中华血液学杂志年12期

Jimbo、Nakajima和Shanna等各报道了1例多发性骨髓瘤（MM)患者神经元特异性稀醇化酶（neuronspecificenolase，NSE)水平升高，国内张忆梓等报道MM患者中NSE升高组的总生存期和无进展生存期均短于NSE正常组。为研究NSE水平与MM的关系以及对病情和疗效监测的价值，我们检测23例MM患者化疗前后NSE水平的变化，观察其变化趋势与MM病情及疗效的关系，以及与MM相关预后指标的关系。

对象和方法

一、研究对象

1.对照组:我院年3月至6月体检健康者47名，其中男29名，女18名，中位年龄37(28~59)岁。

2.小细胞肺癌组：25例小细胞肺癌患者均为我院年3月至年8月肿瘤内科初治住院患者，均有明确的病理学诊断。男21例，女4例，中位年龄53(36~80)岁。

3.MM组:23例MM患者均为我院年5月至年3月住院患者，其中男12例，女11例，中位年龄53(47~62)岁，入院后完善骨髓穿刺、ECT全身骨扫描（或CT平扫、PET-CT等其他影像学方法）、血常规、血生化、血肿瘤标志物、血清蛋白电泳及免疫固定电泳等检查，明确诊断，诊断标准符合文献。

二、研究方法

1.仪器和试剂：电化学发光检测仪（型）为瑞士罗氏公司产品;低速冷冻离心机（KDC-)为安徽中佳公司产品。NSE检测试剂盒、清洗液（ISECleaningSolution)、系统试剂（PROCELL)、定标夜、质控试剂（PreciContiolTumorMa-rer)均为瑞士罗氏公司型电化学发光检测仪专用试剂。

2.NSE检测:取被检查者清晨空腹静脉血4ml,待凝固后以r/min离心（离心半径8cm)分离血清，2h内测定其NSE水平，按照瑞士罗氏公司型电化学发光检测仪及试剂盒说明书操作规程进行检测。正常参考值为0~15μg/L，超出上述正常参考值为阳性。

三、患者病情监测指标

每周期化疗前常规行血常规、肝功能、肾功能、β2-微球蛋白（β2-MG)、血清蛋白电泳、免疫固定电泳、血清免疫球蛋白（IgG、IgA、IgM)定量、轻链定量（κ、λ)、骨髓细胞形态学、血清NSE水平检测;观察并记录MM的伴随症状，如骨质破坏、感染、高黏滞综合征、贫血、高钙血症、肾损害等。

四、统计学处理

采用SPSS16.0软件进行统计学分析。因血清NSE水平在对照组、小细胞肺癌组及MM组均为偏态分布，故结果采用百分位数表示；小细胞肺癌组与对照组、MM组与对照组及小细胞肺癌组与MM组的比较采用秩和检验；MM患者NSE值与相关预后指标β2-MG水平的相关性米用Spearman秩相关检验。P0.05为差异有统计学意义。

结果

对照组、小细胞肺癌组、MM组血清NSE水平比较：见表1。对照组血清NSE水平均在正常参考值范围内，小细胞肺癌组、MM组患者血清中NSE水平在第25、50、75百分位数的值均明显高于对照组，差异有统计学意义（P值均0.05)小细胞肺癌组和MM组相比明显增高，差异有统计学意义(P0.05);MM组患者治疗3个周期后NSE水平均明显下降，治疗前后比较差异有统计学意义（P0.05)。2.MM患者NSE水平与预后相关指标β2-MG水平的相关性分析:Spearman秩相关检验结果显示，初治MM患者β2-MG水平与NSE水平之间呈明显正相关（r=0.，P0.05)。MM患者经3个周期化疗后β2-MG水平与NSE水平之间仍呈明显正相关（r=0.，P0.05)。

讨论

烯醇化酶是在糖酵解途径中催化甘油分解的酶，它由3个亚基（α、β、γ)组成，并形成5种同工酶（αα、ββ、γγ、αγ、βγ)。γ亚基的同工酶存在于神经元和神经内分泌组织，称为NSE，它与神经内分泌起源的肿瘤有关。NSE在小细胞肺癌中的水平显著高于其他类型的肺癌，本研究中初治小细胞肺癌患者NSE值均明显升高，NSE水平作为小细胞肺癌诊断、鉴别诊断的指标并监测放疗、化疗的效果已得到公认;对神经母细胞瘤的灵敏度可达90%以上，可监测疗效及复发。NSE增高还见于少数非小细胞肺癌、甲状腺髓样癌、嗜铬细胞瘤，以及胃癌、乳腺癌、结直肠癌、前列腺癌、黑色素瘤等肿瘤组织。另外，正常红细胞中也存在NSE。有多项研究证实NSE可作为脑损伤敏感、特异的指标，其升高程度反映了脑神经元受损范围的大小和严重程度。有研究指出NSE在淋巴瘤患者中可显著升高。关于NSE与MM的关系，张忆梓等[5]报道MM患者中NSE升高组的总生存和无进展生存期均短于NSE正常组，并且NSE的表达水平与年龄、性别、M蛋白类型、血红蛋白、血肌酐无明显的相关性，与骨髓瘤浆细胞比例、血β2-MG的表达水平有显著的相关性。

日本学者报道1例53岁女性患者诊断为IgG-λ型MM伴胸壁浆细胞瘤，其血清NSE增高，利用免疫染色的方法对其骨髓涂片及左胸壁瘤活检标本进行染色，发现弥漫性的异常浆细胞胞质内NSE着色，证实了骨髓瘤细胞可产生NSE。在数周期的化疗后，随着胸壁浆细胞瘤及骨髓中浆细胞的消失，血清NSE水平也恢复正常。另一日本学者也报道1例68岁IgD-λ型MM患者血清NSE显著增高，免疫组化染色同样可见其在骨髓瘤细胞中的表达，2个周期α-干扰素及VMCP方案化疗后，NSE水平降至正常。Sharma等报道1例75岁的老年男性患者，因骶骨疼痛就诊，入院后查血清钙（Ca2+)和前列腺特异性抗原（PSA)浓度分别为2.9mmoL/L和8.8μg/L，穿刺活检证实为前列腺癌。积极治疗8个月后患者PSA降至1μg/L，而血清NSE升至45μg/L，患者同时出现多部位的骨骼疼痛，高钙血症，尿K-本周蛋白阳性，血IgG免疫球蛋白浓度为66g/L，骨髓活检显示不典型浆细胞占有核细胞的20%~30%，免疫组化染色显示CD、κ轻链及NSE阳性，诊断为IgG-K型MM，给予环磷酰胺、沙利度胺及地塞米松治疗。Liu等报道用免疫组化及PCR方法均检测到MM细胞株及原代细胞内NSE的表达。

我们的研究结果显示，23例受检MM患者中，有21例在初次检测NSE时即有增高。随着化疗的进行，NSE水平呈下降趋势，与MM患者血β2-MG水平的下降趋势基本一致，二者呈明显的正相关。众所周知，β2-MG是MM患者的一项重要预后指标，而NSE在MM患者中的变化趋势与β2-MG的表达水平一致，因此NSE能反映MM患者的病情变化。NSE是肺癌的肿瘤标志物，对诊断、治疗及病情监测具有重要的临床意义。本研究结果显示初治MM患者NSE水平低于肺癌患者，但需扩大样本数进行验证。

我们在临床观察中发现，随着化疗的进行，浆细胞比例、M蛋白等指标下降，每例患者个体的NSE水平虽然呈下降趋势，但综合分析，NSE水平与浆细胞比例及M蛋白指标并无明显的正相关性。分析其原因可能为在肿瘤细胞的生长过程中，细胞增殖加快，糖酵解作用加强，而NSE是参与糖酵解的一种酸性蛋白酶，催化2-磷酸甘油变为烯醇式磷酸丙酮酸，因此，肿瘤细胞胞内NSE增多，释放入血也增多，血清检测值增高。大多数MM患者中成熟浆细胞在肿瘤细胞表型中占主导地位，分裂周期中的细胞比例非常小，浆细胞标志指数代表浆细胞合成DNA状况，反映骨髓瘤进展状态，是判断MM患者预后的重要指标。我们推测，类似于浆细胞标志指数，NSE并非主要反映骨髓瘤细胞负荷，而是动态地反映骨髓瘤细胞增殖速度。NSE可能成为MM—项新的预后指标。因其检测方法简单，花费低，作为肿瘤性疾病的常规检查，NSE可能比浆细胞标志指数更有临床应用价值。